詳細了解生物顯微鏡及其應用

生物顯微鏡是對細胞，組織進(jìn)行觀(guān)察和研究的重要儀器。生物顯微鏡按其性能可分為普通光學(xué)顯微鏡和精密度很高的電子顯微鏡。在解剖學(xué)實(shí)驗中，主要介紹普通光學(xué)顯微鏡。光學(xué)顯微鏡是觀(guān)察人體微細結構的常規儀器。了解和掌握顯微鏡的結構和使用方法是學(xué)習人體形態(tài)結構的有效方法之一。通過(guò)顯微鏡可以觀(guān)察細胞的基本結構和人體各組織，器官的微細結構，使學(xué)習者能更直觀(guān)的掌握人體的結構和功能，對其他課程的學(xué)習起促進(jìn)作用。

原理

1，成像：由外界入射的光線(xiàn)經(jīng)反光鏡發(fā)射向上，或由內光源發(fā)射的光線(xiàn)經(jīng)聚光鏡聚在標本上，使標本有足夠的照明，由標本反射或折射的光線(xiàn)經(jīng)物鏡進(jìn)入光軸與水平面傾斜45度的棱鏡，在目鏡的視場(chǎng)光闌處，成放大實(shí)像，此實(shí)像經(jīng)目鏡的接目透鏡放大成虛像，所以人們看到的是虛像。

2，放大倍數：標本經(jīng)生物顯微鏡的目鏡與物鏡放大后的總放大倍數是顯微鏡與目鏡放大倍數的乘積。

3，分辨率：對任何顯微鏡來(lái)說(shuō)，分辨率是最重要的性能參數。光學(xué)生物顯微鏡的分辨率D與光波波長(cháng)γ，物鏡鏡口角α和介質(zhì)折射率n有關(guān)。因此，光學(xué)顯微鏡中，γ越短，n和α越大，則D值越低，分辨率就越高。通常情況下，α最大值可達到140度，空氣中n=1，最短的可見(jiàn)光的波長(cháng)為450毫米。因此，根據不同的α和γ，可以得到不同的分辨率來(lái)觀(guān)察樣本。最常用的普通光學(xué)顯微鏡的最大分辨率為0.2μm（也就是指區分兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)的最小距離是0.2μm），最大放大倍數可達1000~1500倍，其他顯微鏡都是在此基礎上發(fā)展起來(lái)的。

4，樣品要求：普通光學(xué)生物顯微鏡是利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化來(lái)觀(guān)察的，因而對樣品有較高的要求。觀(guān)察樣品通常要經(jīng)過(guò)固定劑固定、包埋劑包埋后，切成厚度為5μm左右的薄片，經(jīng)染色后才能觀(guān)察，對于活細胞或未經(jīng)染色的細胞不能進(jìn)行觀(guān)察。